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熒光染料,專門用來染細胞膜和其它脂溶性生物結構

發(fā)表時間:2019-07-01 16:14

    細胞膜作為細胞的邊界,不僅在結構上為細胞提供了相對穩(wěn)定的內環(huán)境,并參與了包括物質運輸、信號轉導、細胞凋亡和細胞自噬在內的許多重要生理活動。利用熒光染料對細胞膜進行標記和示蹤的成像技術是研究細胞膜結構和功能的重要手段。

那么細胞膜染色有哪些常見染料可以選擇?

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     其中DiD、DiO、DiI、DiR和DiS染料是最常見的細胞膜染料,它們是一族親脂性的熒光染料,專門用來染細胞膜和其它脂溶性生物結構。該系列染料進入細胞膜后,會在整個細胞膜上側向擴散,在**濃度時可以使整個細胞膜染色。它們與細胞膜結合后熒光強度會大大增強,具有很高的淬滅常數和激發(fā)態(tài)壽命,高熒光強度至少維持在30天,甚至長達2年以上。

    DID染料的染色效率高,均一,不易猝滅,無明顯細胞毒性,且受自身熒光背景干擾小。目前DID已成功應用于多種細胞的體內示蹤研究,如Treg細胞、間充質干細胞、腫瘤細 胞、造血干祖細胞等。


   這些染料熒光顏色區(qū)分明顯:DiI被激發(fā)后為橙色熒光,DiO為綠色熒光,DiD為紅色熒光,DiR為深紅色熒光。所以這些染料可以用來對活細胞進行多色成像和流式分析。DiI和DiO可以分別用標準的FITC和TRITC的濾光片。DiD可以用633 nm He-Ne 激光器激發(fā),有著比DiI更長的激發(fā)波長和發(fā)射波長,在細胞和組織染色中更有價值。DiR的紅外熒光可以穿透細胞和組織,在活體成像中用來示蹤。

   

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